36201 Tolo RNAclean Kit (Magnetic Beads)
产品概述
■ 产品描述
Tolo RNAclean Kit采用磁珠法分离纯化的原理，使用新型的高性能磁珠，配合优化的缓冲体系，可便捷的从样品中进行RNA的分离与纯化，并有效去除蛋白质、无机盐离子和其它杂质等。该试剂盒特别适合体外转录RNA样品的纯化，可快速、高效地去除模板DNA，同时保留RNA的完整性和纯度。纯化产物RNA可用于CRISPR反应、cDNA合成等实验。
■ 产品组分
| Part A: DNA模板去除试剂（-20℃保存） | 36201-01 (25 T) | 36201-02 (50 T) |
 2 × DNase Ⅰ Buffer |
625 μL | 1,250 μL |
 DNase Ⅰ |
100 μL | 200 μL |
 DEPC-treated Water |
250 μL | 250 μL |
| Part B: 纯化磁珠（4℃保存） | 3620F-01 (25 T) | 3620F-02 (50 T) |
 Magnetic Beads a |
625 μL | 1,250 μL |
a. 本产品中Part B组分（纯化磁珠，#3620F）与Part A组分保存条件不同，因此Part B组分需单独运输！
■ 保存条件
Part A组分-20℃储存；Part B组分2～8℃储存（磁珠严禁冷冻！）。
■ 需自备的实验物品
• 无水乙醇
• 异丙醇
• 无核酸酶水
• 96孔磁力架（推荐TOLOBIO 96孔磁力架，货号：#49002）
• 96孔板或PCR 8联排管
• 移液器及吸头
■ 实验流程
1. 按照下表配制30 μL的DNase Ⅰ反应液加入到20 μL的转录产物中，以去除转录体系中的DNA模板。
| 组分 | 体积 |
| 2 × DNase Ⅰ Buffer | 25 μL |
| DNase Ⅰ | 4 μL |
| DEPC-treated Water | 1 μL |
DNase Ⅰ反应体系条件：37℃，30 min。
2. 转录产物纯化
(1)首先将磁珠从4℃冰箱中取出，在室温中放置约30 min，使其温度平衡至室温。颠倒或涡旋振荡使磁珠充分混匀，吸取25 μL磁珠和50 μL异丙醇加入到50 μL待纯化的RNA样品中，用移液器吹打充分混匀。
(2)室温孵育5 min，使RNA结合到磁珠上。
(3)将样品置于磁力架上5 min，待溶液澄清后，小心移除上清。
(4)保持样品置于磁力架上，加入200 μL新鲜配制的80% (v/v)乙醇，漂洗磁珠，室温孵育30 s，小心移除上清。
注：漂洗时使用的80% (v/v)乙醇需要使用Nuclease-free water新鲜配制，配制方法举例如下：分别量取8 mL无水乙醇和2 mL Nuclease-free water，混匀后可得10 mL 80% (v/v)乙醇。
(5)重复步骤4，共漂洗2次。
(6)保持样品始终处于磁力架上，开盖空气干燥磁珠5 min。
注：磁珠开盖晾干时要避免过分干燥，如果磁珠出现龟裂，则提示磁珠过分干燥，此时RNA的洗脱效率会降低。
(7)将样品从磁力架上取出，加入50 μL Nuclease-free water，用移液器吹打以充分混匀，室温静置5 min。
(8)将样品置于磁力架5 min，待溶液澄清后，小心转移上清至一个新的Nuclease-free PCR管中。
(9)将纯化后的RNA于70℃处理10 min，以灭活残留的DNaseⅠ。
常见问题解答
参考文献
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