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V32119S Un1Cas12f1 冻干球(单反应)

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V32119S Un1Cas12f1 冻干球(单反应)

  • 规 格:
    • 48 T
    • 96 T

货 号:

#V32119S


价 格:

¥ 0

¥ 4000


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产品概述

产品描述

Un1Cas12f1(又名 Cas14a)是一种内切核酸酶,其在 tracrRNA:crRNA(或 sgRNA)的引导下,特异结合并切割靶标 ssDNA,且不受 PAM 位点的限制。此外,Un1Cas12f1 也能以 PAM 依赖的方式特异地剪切靶标双链 DNA,使 DNA 双链断裂并生成粘性末端。与其他 Cas12 蛋白类似,Un1Cas12f1 蛋白同样拥有针对ssDNA 的反式切割活性(即旁路剪切活性/附属剪切活性),双链或单链 DNA 靶标均能激活 Un1Cas12f1 的式剪切活性,即当 Un1Cas12f1 蛋白与 sgRNA、靶标 DNA 结合形成三元复合物后,便会被激活针对非特异序列 ssDNA 的反式剪切活性,将体系中的任意序列 ssDNA 切碎。相比于其他的 Cas 蛋白,Cas12f1 蛋白的分子量普遍较小(400~700AA),其中 Un1Cas12f1 的分子量约 61.5 kD,可用于靶标核酸的分子检测(详细信息请参考 PMID: 30337455)。

本产品为无甘油冻干型 Un1Cas12f1 核酸酶,可在室温下运输和储存。使用冻干复溶液溶解后,其性能与非冻干型 Un1Cas12f1 核酸酶(#32119,ToloBio)相当。该产品可以粉末和球状等多种冻干形式提供,以满足不同下游应用的需要。

 

 

产品组分

组分

V32119S-SP V32119S-01 V32119S-02
 Un1Cas12f1 冻干球(单反应)

8 T

48 T

96 T
 10 × HOLMES Buffer for Cas12f

1 mL

1 mL 1 mL

◆ 单个反应的冻干粉中 UnlCas12f1 含量为 10 pmol,建议用于 20 μL CRISPR 反应体系。

 

 

保存条件

本产品常温保存及运输;复溶后于-20℃保存,避免反复冻融。

 

 

实验流程

1.冰上制备如下CRISPR反式剪切反应体系:

组分

体积 

终浓度 

10 × HOLMES Buffer for Cas12f(#32044)

2 μL 1 ×

10 μM sgRNA

0.5 μL 250 nM

1 μM Target DNA

0.5 ~ 5 μL 25 nM ~ 250 nM

10 μM HOLMES ssDNA Reporter (#31101)

0.5 μL 250 nM

Nuclease-free water

Up to 20 μL  

2. 将上述 mix 20 μL 混匀后加入单个反应体系的冻干粉/或冻干球,使之溶解。

3. 立即放入实时荧光定量 PCR 仪检测荧光信号,37°C 反应,每 30 sec 采集一次荧光信号。

 

 

实验结果

 

 

注意事项

1. 利用本产品的反式剪切活性进行分子诊断实验,可参考本公司的 HOLMES[1]体系。

2. 为防止 RNase 污染,请保持实验区干净整洁,操作时需穿戴干净的手套、口罩,实验所用枪头、离心管等耗材均为 RNase-free。

3. 本产品仅包含 Cas 酶,CRISPR 反应体系中所需的 Target DNA 和 crRNA 需要自己制备,10×HOLMES Buffer for Cas12f (#32044)和 10 μM HOLMES ssDNA Reporter (#31101)推荐从 TOLOBIO 选购。

4. 复溶后的Un1Cas12f1 需在冰上配制反应体系,且使用后立即将酶置于-20℃保存 (-20℃可保存一个月)。

5. 本产品仅供科研使用。

 

常见问题解答

产品说明书

#V32119 Un1Cas12f1(冻干型)

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434.0KB

参考文献

COA查询

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