32119L Un1Cas12f1 Nuclease (Lyophilized Powder)（冻干粉）
产品概述
■ 产品简介
Un1Cas12f1(又名Cas14a)是一种内切核酸酶，其在tracrRNA:crRNA(或sgRNA)的引导下，特异结合并切割靶标ssDNA，且不受PAM位点的限制。此外，Un1Cas12f1也能以PAM依赖的方式特异地剪切靶标双链DNA，使DNA双链断裂并生成粘性末端。与其他Cas12蛋白类似，当Un1Cas12f1蛋白与sgRNA、靶标DNA结合形成三元复合物后，能启动针对非特异序列ssDNA的剪切，将体系中的任意序列ssDNA切碎。相比于其他的Cas蛋白，Cas12f1蛋白的分子量普遍较小(400~700 AA)，其中Un1Cas12f1的分子量约61.5 kD。
本产品为不含甘油的冻干型Un1Cas12f1核酸酶，可在室温下运输和储存。用冻干复溶液溶解后，其性能与非冻干型Un1Cas12f1核酸酶（ToloBio，货号：#32119）相当。该产品可提供冻干粉、冻干球等多种产品形态，以满足不同应用场景的需要。
■ 产品组分
| UnlCas12f1 Nuclease (Lyophilized Powder) Part A | 32119L-01 | 32119L-02 |
 UnlCas12f1 Nuclease (Lyophilized Powder) |
100 μg | 100 μg × 5 |
 Cas Reconstitution Solution |
200 μL | 1 mL |
| UnlCas12f1 Nuclease (Lyophilized Powder) Part B | 32044-00 | 32044-01 |
 10 × HOLMES Buffer for Cas12f (#32044) |
1 mL | 1 mL × 5 |
• 建议用150 μL复溶液复溶100 μg UnlCas12f1冻干粉，复溶后酶浓度为10 μM，即10 pmol/μL。复溶后于-20°C保存，避免反复冻融。
■ 保存条件
PartA可常温储存及运输。PartB需-20℃储存，≦4℃运输。
■ 实验流程
32119L 系列推荐反应体系
1) 冰上制备如下CRISPR反式剪切反应体系：
| 组分 | 体积 | 终浓度 |
| 10 × HOLMES Buffer for Cas12f (#32044) | 2 μL | 1 × |
| 10 μM UnlCas12f1 Nuclease | 0.5 μL | 250 nM |
| 10 μM sgRNA | 0.5 μL | 250 nM |
| 1 μM Target DNA | 0.5~5 μL | 25~250 nM |
| 10 μM HOLMES ssDNA Reporter (#31101) | 0.5 μL | 250 nM |
| Nuclease-free Water | Up to 20 μL |
2) 立即放入实时荧光定量PCR仪检测荧光信号，37℃反应，每30 sec采集一次荧光信号。
■ 实验结果
常见问题解答
参考文献
COA查询
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