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V32108T LbCas12a (Cpf1) Nuclease(冻干粉-单反应)

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V32108T LbCas12a (Cpf1) Nuclease(冻干粉-单反应)

  • 规 格:
    • 48 T
    • 96 T

货 号:

#V32108T


价 格:

¥ 0

¥ 1320


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产品概述

产品描述

LbCas12a (又名Cpf1)核酸酶来源于Lachnospiraceae bacterium ND2006菌株。LbCas12a是由crRNA介导的DNA核酸内切酶,在靶标双链DNA存在PAM (TTN) 序列的情况下,特异地剪切靶标双链DNA,使DNA双链断裂并生成粘性末端LbCas12a特异地剪切单链DNA靶标不依赖PAM序列。此外,双链或单链DNA靶标均能激活LbCas12a的反式剪切活性(即旁路剪切活性/附属剪切活性),即当LbCas12acrRNA、靶标DNA结合形成三元复合物后,便会被激活针对非特异序列ssDNA的反式剪切活性,将体系中的任意序列ssDNA切碎。因此,LbCas12a不仅可用于体外dsDNA的特异剪切,也可用于靶标核酸的快速检测,详见本公司开发的HOLMES[1]核酸快检技术。

本产品将无甘油LbCas12a核酸酶冻干,可用于常温运输及保存,使用配套的冻干Cas酶复溶液复溶后,具有与本公司非冻干型LbCas12a (Cpf1) Nuclease#32108)同等的反应活性。本产品包括可用于单个反应的酶冻干粉及冻干球等多种冻干形态,满足不同下游反应体系构建的需求。

 

 

产品组分

组分

V32108T-01

V32108T-02

 LbCas12a Lyophilized Powder(8-TUBE STRIPS)

48 T

96 T

· 单个反应的冻干粉中LbCas12a含量为5 pmol,建议用于20 μL CRISPR反应体系;

 

 

保存条件

本产品常温保存及运输;复溶后于-20℃储存,避免反复冻融。

 

 

实验流程

1.冰上制备如下除Cas酶外的CRISPR反式剪切反应体系 mix:

组分

体积

终浓度

10 × HOLMES Buffer 1(#32005)

2 μL

1 × 

10 μM crRNA

0.5 μL

250 μM
1 μM Target DNA  0.5 ~ 5 μL

25 ~ 250 μM

10 μM HOLMES ssDNA Reporter(#31101)  0.5 μL

250 μM

Nuclease-free Water

Up to 20 μL

 

2.将上述 mix 20 μL混匀后加入单个反应体系的冻干粉,使之溶解。

3.立即放入实时荧光定量 PCR仪检测荧光信号,37℃反应,每 30 sec采集一次荧光信号。

 

 

实验结果

 

 

注意事项

1. 利用本产品的反式剪切活性进行分子诊断实验,可参考本公司的 HOLMES[1]体系。

2. 为防止 RNase 污染,请保持实验区干净整洁,操作时需穿戴干净的手套、口罩,实验所用枪头、离心管等耗材均为 RNase-free。

3. 本产品仅包含 Cas 酶,CRISPR 反应体系中所需的 Target DNA 和 crRNA 需要自己制备,10 × HOLMES Buffer 1 (#32005)和 10 μM HOLMES ssDNA Reporter (#31101)推荐从 TOLOBIO 选购。

4. 复溶后的 LbCas12a 需在冰上配制反应体系,且使用后立即将酶置于-20℃保存 (-20℃可保存一个月)。

5. 本产品仅供科研使用。

常见问题解答

产品说明书

#V32108 LbCas12a (Lyo)-V151.3.0

pdf

814.2KB

参考文献

COA查询

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