32117LP LwaCas13a (C2c2) Nuclease (Lyophilized Powder,8-Strip PCR Tubes) (单反应冻干粉)
产品概述
■ 产品简介
LwaCas13a(以前称为 C2c2)是一种由crRNA介导的RNA内切酶,源自Leptotrichia wadei菌株。LwaCas13a在crRNA的引导下特异性剪切ssRNA靶标,对PFS位点的依赖性较低。当LwaCas13a与crRNA和靶RNA结合形成三元复合物时,能启动针对非特异序列ssRNA的剪切。
本产品为不含甘油的冻干型LwaCas13a核酸酶,可在室温下运输和储存。用冻干复溶液溶解后,其性能与非冻干型LwaCas13a核酸酶(ToloBio,货号:#32117)相当。该产品可提供冻干粉、冻干球等多种产品形态,以满足不同应用场景的需要。
■ 产品组分
| LwaCas13a Nuclease (Lyophilized Powder,8-Strip PCR Tubes) Part A | 32117LP-01 | 32117LP-02 |
LwaCas13a Nuclease (Lyophilized Powder,8-Strip PCR Tubes) |
48 T | 96 T |
| LwaCas13a Nuclease (Lyophilized Powder,8-Strip PCR Tubes) Part B | 32045-00 | 32045-00 |
10 × HOLMES Buffer for Cas13a (#32045) |
1 mL | 1 mL |
• 单个反应的冻干粉中LwaCas13a含量为5 pmol,建议用于20 μL CRISPR反应体系。
■ 保存条件
PartA可常温储存及运输。PartB需-20℃储存,≦4℃运输。
■ 实验流程
32117LP 系列推荐反应体系
1) 冰上制备如下除Cas酶以外的反应体系mix:
| 组分 | 体积 | 终浓度 |
| 10 × HOLMES Buffer for Cas13a (#32045) | 2 μL | 1 × |
| 10 μM crRNA | 0.5 μL | 250 nM |
| 1 μM Target RNA | 0.5~5 μL | 25~250 nM |
| 10 μM ssRNA Reporter (#31111) | 0.5 μL | 250 nM |
| Nuclease-free Water | Up to 20 μL |
2) 将上述mix 20 μL混匀后加入单个反应体系的冻干粉/或冻干球,使之溶解。
3) 立即放入实时荧光定量PCR仪检测荧光信号,37℃反应,每30 sec采集一次荧光信号。
■ 实验结果

常见问题解答
参考文献
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