32108L LbCas12a (Cpf1) Nuclease (Lyophilized Powder)（冻干粉）
产品概述
■ 产品简介
LbCas12a (又名Cpf1)核酸酶来源于Lachnospiraceae bacterium ND2006菌株。LbCas12a是由crRNA介导的DNA核酸内切酶，在靶标双链DNA存在PAM (TTN) 序列的情况下，特异地剪切靶标双链DNA，使DNA双链断裂并生成粘性末端。而LbCas12a特异地剪切单链DNA靶标不依赖PAM序列。当LbCas12a酶与crRNA、靶标DNA结合形成三元复合物后，能启动针对非特异序列ssDNA的剪切，将体系中的任意序列ssDNA切碎。因此，LbCas12a酶可用于靶标核酸的快速检测，详见本公司开发的HOLMES[1]核酸快检技术。
本产品为不含甘油的冻干型LbCas12a核酸酶，可在室温下运输和储存。用冻干复溶液溶解后，其性能与非冻干型LbCas12a核酸酶（ToloBio，货号：#32108）相当。该产品可提供冻干粉、冻干球等多种产品形态，以满足不同应用场景的需要。
■ 产品组分
| LbCas12a Nuclease (Lyophilized Powder) Part A | 32108L-01 | 32108L-02 |
 LbCas12a Nuclease (Lyophilized Powder) |
100 μg | 100 μg × 5 |
 Cas Reconstitution Solution |
200 μL | 1 mL |
| LbCas12a Nuclease (Lyophilized Powder) Part B | 32042-00 | 32042-01 |
 10×HOLMES Buffer For Cas12a (#32042) |
1 mL | 1 mL × 5 |
• 建议使用136 μL复溶液复溶100 μg LbCas12a冻干粉，复溶后酶浓度为5 μM，即5 pmol/μL。复溶后于-20°C保存，避免反复冻融。
■ 保存条件
PartA可常温储存及运输。PartB需-20℃储存，≦4℃运输。
■ 实验流程
32108L 系列推荐反应体系
1) 冰上制备如下反应体系：
| 组分 | 体积 | 终浓度 |
| 10×HOLMES Buffer For Cas12a (#32042) | 2 μL | 1 × |
| 5 μM LbCas12a Nuclease | 1 μL | 250 nM |
| 10 μM crRNA | 0.5 μL | 250 nM |
| 1 μM Target DNA | 0.5~5 μL | 25~250 nM |
| 10 μM HOLMES ssDNA Reporter (#31101) | 0.5 μL | 250 nM |
| Nuclease-free Water | Up to 20 μL |
2) 立即放入实时荧光定量PCR仪检测荧光信号，37℃反应，每30 sec采集一次荧光信号。
■ 实验结果
■ 参考文献
[1] Li S, Cheng Q, Wang J, et al. CRISPR-Cas12a-assisted nucleic acid detection[J]. Cell Discovery. 2018, 4: 20.
常见问题解答
参考文献
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