32101L SpCas9 Nuclease (Lyophilized Powder)（冻干粉）
产品概述
■ 产品简介
SpCas9是一种由crRNA和tracrRNA（或单独的sgRNA）引导的DNA内切酶，来源于S. pyogenes菌株。SpCas9以PAM（NGG）依赖的方式特异性识别并切割 dsDNA 靶标。Cas9 在靶序列中的切割位点距离PAM位点3 bps。此外，SpCas9还能在DNA PAMmer序列存在的情况下特异性地裂解ssDNA或ssRNA（详情请参阅PMID: 24476820; PMID: 25274302）。
本产品为不含甘油的冻干型SpCas9核酸酶，可在室温下运输和储存。用冻干复溶液溶解后，其性能与非冻干型SpCas12b核酸酶（ToloBio，货号：#32101）相当。该产品可提供冻干粉、冻干球等多种产品形态，以满足不同应用场景的需要。
■ 产品组分
| SpCas9 Nuclease (Lyophilized Powder) Part A | 32101L-01 | 32101L-02 |
 SpCas9 Nuclease (Lyophilized Powder) |
100 μg | 100 μg × 5 |
 Cas Reconstitution Solution |
200 μL | 1 mL |
| SpCas9 Nuclease (Lyophilized Powder) Part B | 32041-00 | 32041-01 |
 10 × HOLMES Buffer for Cas9 (#32041) |
1 mL | 1 mL × 5 |
• 建议用124 μL复溶液复溶100 μg SpCas9冻干粉，复溶后酶浓度为5 μM，即5 pmol/μL。复溶后于-20°C保存，避免反复冻融。
■ 保存条件
PartA可常温储存及运输。PartB需-20℃储存，≦4℃运输。
■ 实验流程
32101L 系列推荐反应体系
1) 冰上制备如反应体系：
| 组分 | 体积 | 终浓度 |
| 10 × HOLMES Buffer for Cas9 (#32041) | 2 μL | 1 × |
| 5 μM SpCas9 Nuclease | 1 μL | 250 nM |
| 10 μM sgRNA | 0.5 μL | 250 nM |
| 1 μM Target dsDNA | 0.5 μL | 25 nM |
| Nuclease-free Water | Up to 20 μL |
2) 将反应混合物在37℃下反应 30 min，然后85℃下，5 min，灭活。用核酸电泳分析产物。
■ 实验结果
常见问题解答
参考文献
COA查询
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