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CC96305 GV3101(pSoup)
产品概述
产品描述
GV3101(pSoup)菌株为C58型背景，核基因中含有筛选标签——利福平抗性基因Rif，为了便于转化操作，此菌株携带一无自身转运功能的胭脂碱型Ti质粒pMP90(pTiC58DT-DNA)，此质粒含有vir基因(vir基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件，pMP90(pTiC58DT-DNA)质粒自身的T-DNA转移功能被破坏，但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移)。pMP90(pTiC58DT-DNA)型Ti质粒含有筛选标签Gent，赋予GV3101菌株庆大霉素抗性；在GV3101菌株中转入help质粒：pSoup即为GV3101(pSoup)菌株，可帮助pGreen，62SK，pGs2系列质粒在农杆菌中复制，同时赋予该菌株四环素(Tet)抗性。适用于拟南芥、烟草、玉米、土豆等植物的转基因操作。本公司生产的GV3101(pSoup)化学转化感受态细胞经特殊工艺制作，pGs2(KanR)质粒检测转化效率≥ 103 cfu/μg DNA。
产品优势
✽ 高转化效率：>1×103 cfu/µg
产品组分
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组分 |
CC96305-01 |
CC96305-02 |
CC96305-03 |
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GV3101(pSoup)化学感受态 |
10×100 μL |
100×100 μL |
定制 |
|基因型：C58 (RifR) Ti pMP90 (pTiC58DT-DNA) (GentR) Nopaline(pSoup-TetR)
产品应用
GV3101(pSoup)菌株适用于拟南芥、烟草、玉米、土豆等植物的转基因操作。
实验流程
1. 将感受态细胞从-80℃中取出，在手心或室温片刻使其部分融化，处于冰水混合状态时插入冰中；
2. 每100 μL感受态加入0.01-1 μg待转化的质粒DNA(加入质粒DNA体积不超过10 μL)，用手轻轻拨打管底混匀，依次于冰上静置10 min、液氮5min (或-70℃干冰乙醇浴 5 min)、37℃水浴 5 min、冰浴5 min；
3. 加入900 μL无抗生素的YEB液体培养基，于28℃振荡培养2~3小时。
4. 6000 rpm，1 min离心收菌，留底部100 μL左右菌液轻轻吹打重悬菌块，涂布于含相应抗生素的YEB平板上，倒置放于28℃培养箱培养2~3天(当平板只含有50 μg/mL Kan时，28℃培养48 h即可；平板中同时加入50 μg/mL Kan，20 μg/mL Rif时，需28℃培养60 h；如果使用的平板含有50 μg/mL Rif时，则需要28℃培养72~90 h)。
保存条件
-80℃保存；请勿将本品置于-20℃或者液氮中保存。
相关参数
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感受态类型 |
化学感受态 |
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感受态菌株名称 |
GV3101(pSoup) |
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种属 |
根瘤农杆菌 |
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转化效率 |
高效率 (>1×10^3 cfu/µg) |
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菌株用途 |
植物转基因 |
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应用特征 |
适用于拟南芥、烟草、玉米、土豆等植物的转基因操作 |
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菌株抗性 |
利福平；庆大霉素；四环素 |
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培养基 |
YEB |
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培养条件 |
28℃ |
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保存条件 |
-80℃ |
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运输条件 |
干冰 |
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包装规格 |
管装 (100 µL/管) |
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出品公司 |
ToloBio |
常见问题解答
参考文献
COA查询
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