96002 CopyMore 400(1,000 ×)
产品概述
产品简介
本诱导剂可以提高 EPI400 大肠杆菌中大部分常见质粒(含 colE1 或 pMB1 复制子)的拷贝数。非诱导情况下,EPI400 菌株(ToloBio,# CC96177)中质粒的拷贝数极低,加入 CopyMore 400 诱导剂后可启动质粒的快速复制,短期获得高产量的质粒 DNA(例如:pUC 系列质粒拷贝数从 10 增加至 200;pET 系列质粒拷贝数从 10 增加至 20;pBR322 系列质粒拷贝数从 20 增加至 70 左右)。
产品组成
| 组分 | 96002-01 | 96002-02 |
CopyMore 400(1,000 ×) |
1 mL | 25 mL |
保存条件
-20℃储存,≤ 0℃运输;无菌状态下使用。
实验流程
1. 挑选单克隆,在添加了抗生素的液体 LB 中过夜培养。
2. 取适量过夜培养的大肠杆菌转接至新鲜的 LB 培养基中,使转接后细胞 OD600 在 0.2 左右,然后加入适量抗生素和 CopyMore 400 诱导剂,使 CopyMore 400 诱导剂的终浓度为 1 ×。如 50 mL 培养液中需加入 50 μL CopyMore 400(1,000 ×)。
3. 37℃摇床,220 rpm 培养 4 h,然后抽提质粒。
注意事项
1. 本诱导剂应置于-20℃保存,并避免反复冻融。
2. 可以根据实际使用情况,在无菌环境下将诱导剂分装后冻存;如果诱导剂染菌变浑浊,请停止使用。
3. 本诱导剂的使用浓度已经过优化;适当增加诱导剂的使用终浓度,可提高质粒拷贝数的诱导效率。
4. 加入诱导剂后,振荡培养非常重要;需要保证细菌在有氧的条件下生长。
5. 若挑取单克隆到液体 LB 培养基后,直接加入本诱导剂过夜培养,质粒拷贝数的诱导效率可能会受到影响。
6. 本诱导剂对含有 colE1 或 pMB1 复制子质粒的拷贝数有诱导作用。
7. 本产品仅供科研使用。
常见问题解答
参考文献
COA查询
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