96001 CopyMore 300（1,000 ×）
产品概述
产品简介
本诱导剂可以提高 EPI300 大肠杆菌中含 oriV 复制子质粒的拷贝数，适用于 pCC1、pCC2 等系列质粒在 EPI300 菌株中的诱导。EPI300 菌株（ToloBio，# CC96163）含有一个突变的 trfA 基因，该基因表达的蛋白产物可以促进含有 oriV 复制子质粒的高拷贝复制。在非诱导情况下，trfA 基因的表达被抑制，oriV 复制子质粒的拷贝数维持在很低的水平；当在培养基中加入诱导剂 CopyMore 300 时，可以大幅度增加 oriV 复制子质粒的拷贝数，进而提高质粒产量。
产品组分
| 组分 | 96001-01 | 96001-02 |
 CopyMore 300（1,000 ×） |
1 mL | 25 mL |
保存条件
-20℃储存，≤ 0℃运输；无菌环境中使用。
实验流程
1. 挑选单克隆，在添加了抗生素的液体 LB 培养基中过夜培养。
2. 取适量过夜培养的大肠杆菌转接至新鲜的 LB 培养基中，使转接后细胞 OD600 在 0.2 左右，然后加入适量抗生素和 CopyMore 300 诱导剂，使 CopyMore 300 诱导剂的终浓度为 1 ×。如 50 mL 培养液中需加入 50 μL CopyMore 300（1,000 ×）。
3. 37℃摇床，220 rpm 培养 4 h，然后抽提质粒。
注意事项
1. 本诱导剂应置于-20℃保存，并避免反复冻融。
2. 可以根据实际使用情况，在无菌环境下将诱导剂分装后冻存；如果诱导剂染菌变浑浊，请停止使用。
3. 本诱导剂的使用浓度已经过优化；适当增加诱导剂的使用终浓度，可提高质粒拷贝数的诱导效率。
4. 加入诱导剂后，振荡培养非常重要；需要保证细菌在有氧的条件下生长。
5. 若挑取单克隆到液体 LB 培养基后，直接加入本诱导剂过夜培养，质粒拷贝数的诱导效率可能会受到影响。
6. 本诱导剂只对含有 oriV 复制子质粒的拷贝数有诱导作用； 其它类型复制子的质粒， 在 EPI300 中正常复制，不受诱导。
7. 本产品仅供科研使用。
常见问题解答
参考文献
COA查询
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