■ 产品简介

Tolo SafeRed Nucleic Acid Stain 是一种可以替代溴化乙锭(EB)的新型核酸染料，具有灵敏度高，毒性低，热稳定性强等诸多优势，对微量DNA，尤其是微量小分子DNA具有更高的检测灵敏度。经本品染色的DNA条带在紫外光透射下呈现红色荧光，适用于琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳中的dsDNA、ssDNA及RNA染色。

■ 产品组成

■ 保存条件

4℃储存，常温运输。

■ 产品优势

1. 灵敏度高，小分子片段更清晰。

2. 对核酸上样量有更好的兼容性，不会出现浓度高片段弯曲现象。

3. 染料在胶中迁移度低，电泳后紫外观察不会出现阴阳胶现象。

4. 花菁素染料，安全无毒。

■ 使用方法

1. Tolo SafeRed Nucleic Acid Stain 预染方法

1.1 将Tolo SafeRed Nucleic Acid Stain试剂按1:10000溶于琼脂糖凝胶溶液中，充分混匀(例如：将5 μL Tolo SafeRed Nucleic Acid Stain 试剂加入到50 mL凝胶溶液中)。

• 染料使用前应在常温下彻底融化混匀后使用。

• 由于Tolo SafeRed Nucleic Acid Stain具有出色的热稳定性，可将试剂直接加入高温的凝胶溶液中，而不用等凝胶溶液冷却后再加入。

1.2 浇制凝胶并使其凝固后上样电泳。

• 使用这种预先加入染色剂的琼脂糖凝胶，每次不宜加入太多的DNA样品，否则容易造成饱和现象，可以做多个不同浓度的DNA Marker，以确定最佳DNA上样量。

1.3 紫外下观察结果。

• 如果始终出现拖尾或是条带无法分离的现象，您可以使用后染法对DNA染色，以确认问题是否与染色剂有关。如果使用后染法问题依旧存在，则说明问题与染色剂无关，请尝试减少核酸的上样量后进行电泳。

2. Tolo SafeRed Nucleic Acid Stain后染方法

2.1 用H2O将Tolo SafeRed Nucleic Acid Stain 稀释约3,300 倍，制成3×染色溶液(例如：将15 μL Tolo SafeRed Nucleic Acid Stain加入到45 mL H2O中)。

2.2 将凝胶小心地放入合适的容器中(例如：聚丙烯容器中)，缓慢加入足量的3×染色溶液浸没凝胶。

2.3 在常温下轻轻地摇动凝胶板，最佳的染胶时间为30分钟，这取决于凝胶板的厚度、琼脂糖或聚丙烯酰胺的浓度和DNA的长短。凝胶越厚或琼脂糖的浓度越高，染色所需要的时间就越长。

• 染色溶液至少可重复使用2-3次。如果不是立即再用的话，建议将用过的染色溶液冷藏保存。

2.4 紫外下观察结果。

■ 注意事项

1. 鉴于Tolo SafeRed Nucleic Acid Stain的高灵敏性，建议减少样品的上样量，推荐已知浓度样品的上样量为 50-200 ng/泳道。

2. 电泳时电压不宜超过150 V。

3. 为了避免染料对核酸迁移的影响，推荐使用泡染法进行染色。

4. 若条带分离效果不理想，建议使用泡染法确认是否系染料影响核酸迁移所致。如果泡染后问题依旧，建议重新制备样品重复试验。