产品中心
36113 ToloPrep Gel Extraction and PCR PurificationKit
产品概述
产品描述
本试剂盒适用于从TAE或TBE电泳缓冲液配制的琼脂糖凝胶、PCR反应产物或其他酶促反应物中提取纯化高质量的DNA，回收效率可达80%。该试剂盒采用特殊的吸附膜，能够有选择地吸附核酸分子，去除反应液中的各种蛋白、引物、dNTP等，得到高质量的DNA纯化产物，可直接用于酶切、测序等后续的分子生物学试验。本试剂盒具有以下特点：
1. 适用范围广，回收效率高，对于100 bp -10 kb之间的DNA片段回收效率在 80% 以上。
2. 单柱可吸附10 μg DNA。
3. 操作简单快速，整个回收过程仅需 15 min。
产品组分
|
组分 |
#36101-01（200 rxns） |
|
○ 纯化套装（吸附柱 + 收集管） |
200 套 |
|
○ Buffer PG |
100 mL |
|
○ Buffer PS |
60 mL |
|
○ Buffer PW（concentrate） |
50 mL |
|
○ Buffer EB |
30 mL |
|
○ 操作手册 |
一份 |
保存方法及注意事项
本试剂盒在室温 (15-25°C)干燥保存，有效期见包装。
Buffer PG和Buffer PS中含有刺激性的化合物，操作过程中应穿上实验服，戴好乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服，防止吸入口鼻。沾染皮肤或眼睛后，请立即用清水或生理盐水冲洗，必要时寻求医生的帮助。
本产品仅供科研使用。
常见问题解答
Q1: PCR产物回收效率较低或者未回收到目的片段？
A1: 胶块溶解不完全，可适当延长水浴的时间并增加颠倒混匀的频率辅助溶解。
A2: 胶块体积太大，溶胶困难，可先将胶块切碎，溶胶后分多次上柱离心，回收DNA片段。
A3: 漂洗液中未加入正确量的无水乙醇。
A4: Agarose抑制DNA与吸附材料的结合。应尽量切除不含目的DNA片段的Agarose胶。
A5: 提高Buffer EB的相对浓度，增加DNA与吸附膜的作用时间（静置时间）在一定程度上可以提高回收率。
A6: 如果纯化的片段长度大于 4 kb 或者目的片段含量较少，可以将洗脱液再次加入至吸附柱中进行洗脱以提高回收效率。
A7: 洗脱液加入位置不正确，洗脱液应加在硅胶膜的中心部位，以完全覆盖硅胶膜的表面，达到最大的洗脱效率。
A8: 洗脱液不合适，洗脱缓冲液的 pH 值对洗脱效率有影响，如果使用水进行洗脱， 请确保其 pH 值＞ 7.0，pH 值过低可能导致低洗脱效率。
A9: 洗脱时间过短，洗脱时放置5 min可达到较好的洗脱效果，洗脱时将洗脱液预热至 50℃ 后使用，有利于提高洗脱效率。
Q2: 回收DNA惊醒后续酶切反应效率低？
A1: 洗脱产物中含有残留的乙醇，可将空柱离心后的吸附柱开盖室温干燥 2-5 min， 有助于残留的酒精挥发完全。
A2:盐分的残留，可以适当使用更多的Buffer PW洗涤，每次750 μL沿管壁加入，有助于彻底去除管壁上的盐分。
A3:琼脂糖质量差，请选用高质量的琼脂糖。
Q3: 回收DNA惊醒后续酶切反应效率低？
A1: Buffer PW未彻底去除，残留的乙醇混入了回收产物中。
A2:配置琼脂糖凝胶的电泳缓冲液浓度过高或陈旧，应重新配置缓冲液。
Q4: 洗脱液的选择？
A1: 洗脱液可以根据后续实验的需要来确定，一般情况下，若需要进行测序反应，请用双蒸水洗脱，如果需要长期保存 DNA，请用 TE 洗脱。
参考文献
COA查询
相关产品
