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25102 2 × Tolo Fluorescent LAMP Premix

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25102 2 × Tolo Fluorescent LAMP Premix

  • 规 格:
    • 100 rxns

货 号:

25102


价 格:

¥ 0

¥ 1680


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产品概述

产品描述

2 × Tolo Fluorescent LAMP Premix 适用于以 DNA 模板的 LAMP (环介导等温扩增) 反应。LAMP 是常见的等温扩增技术,使用 LAMP 特异性引物和链置换聚合酶 Bst.快速扩增靶标核酸。该试剂盒是 2×预混液,包含 Bst.链置换聚合酶和优化的 LAMP 缓冲液。本产品中采用基因工程改造的 Tolo Bst. DNA polymerase,具有良好的耐热性能,非常适宜 LAMP 扩增。本产品同时提供荧光染料,便于在靶标核酸扩增过程中进行实时荧光监测。

 

 

产品组分

组分

25102(100 rxns) 

○ 2 × Tolo Super LAMP Premix

1.25 mL

50 × LAMP Fluorescent Dye

50 μL

 

 

保存条件

≤ -20℃避光储存,≤ 0℃运输;

 

 

实验流程

1.制备10 × LAMP Primers Mix:

组分

体积 

10 × 浓度(STOCK)

1 × 浓度(FINAL) 

FIP Primers(100 μM)

16 μL 16 μM 1.6 μM
BIP Primers(100 μM) 16 μL

16 μM

1.6 μM

F3 Primers(100 μM) 2 μL

2 μM

0.2 μM

B3 Primers(100 μM) 2 μL

2 μM

0.2 μM

Loop F Primers(100 μM)

4 μL

4 μM

0.4 μM

Loop B Primers(100 μM) 4 μL

4 μM

0.4 μM

ddH2O

Up to 100 μL    

 · 在 nuclease-free water 中制备的 10 ×LAMP Primers Mix 可在–20°C 储存长达 2 年。

 

2.制备LAMP 反应体系:

组分

体积

2 × Tolo Super LAMP Premix

12.5 μL

10 × LAMP Primers(supplied by user)

2.5 μL

50 × LAMP Fluorescent Dye

0.5 μL

Target DNA

x μL(不超过反应总体积的 1/10)

ddH2O

Up to 25 μL

 · 室温解冻所有组分后置于冰上,短暂涡旋并瞬离后使用。

 · 吸取反应预混液到所需的反应容器中并添加待测样品,短暂涡旋并瞬离后反应。

 · 建议设置无模板的阴性对照反应体系,并用等体积的 nuclease-free water 补齐反应体系。

 

3.LAMP 反应程序

配制完成后,将上述反应体系置于 65℃孵育 30~60 min。对于拷贝数较低的待测靶标或复杂样品类型的反应,可根据需要适当延长扩增时间。85℃加热 5 min 便可灭活体系中的 Bst.酶。

 

 

注意事项

1. 可在冰上或室温条件下,将 2 × Tolo Super LAMP Premix 解冻,充分混匀后使用;不推荐对预混液进行加热溶解。

2. 建议反应完成后避免开盖。如需琼脂糖凝胶电泳或其他后续分析,应在分区空间或单独设备中进行开盖。

3. 本产品仅供科研使用。

常见问题解答

Q1: 如何防止气溶胶污染?

A1: 核酸提取和扩增应严格分区;扩增反应全程应尽量避免开盖。

 

Q2: 扩增效率不高是什么原因?

A1: 逐一排除体系污染、非特异性扩增、DNA 模板纯度、引物质量、引物比例 (通常 FIP/BIP∶LF/LB∶F3/B3 为 8∶2∶1,具体可调整) 等情况,并进行适当体系优化,比如镁离子浓度、扩增温度等。

产品说明书

#25102 2 × Tolo Fluorescent LAMP Premix-A4-V261.1.0

pdf

886.8KB

参考文献

COA查询

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